使用MatriMix进行癌症患者来源细胞的小鼠皮下移植实验

使用MatriMix进行癌症患者来源细胞的小鼠皮下移植实验

◆实验概要

在癌症的病态分析和治疗药物的开发中，通过移植癌症患者来源细胞至小鼠体内来制备PDX模型（Patient-Derived Xenograft）的研究备受瞩目。在该实验中，我们调查了MatriMix（511）能否用作小鼠移植的基质。将大肠癌患者细胞的肿瘤球与MatriMix（511）混合后，皮下移植至小鼠体内，观察是否有肿瘤形成，并进行组织学分析。

◆实验方法

1. 按照说明书上的步骤，混合MatriMix（511）的A、B、C液。

2. 在冰上使用肿瘤球培养用培养基将MatriMix（511）溶液稀释1.5倍。

3. 按照常规方法，回收3D培养制备的肿瘤球。

4. 每只小鼠使用100 µL MatriMix（511）溶液悬浮0.5×10⁵cells的球体

5. 将悬浊了肿瘤球的MatriMix（511）溶液填充至FN注射器（27G）中，移植至小鼠皮下

6. 观察肿瘤随时间形成的过程

7. 固定回收的肿瘤，进行组织学分析。

◆实验结果

● 将癌症患者来源的肿瘤球移植至小鼠体内时，即使使用MatriMix（511）也能形成与EHS肿瘤提取物相同大小的肿瘤（红色箭头）（图1）。

● 对使用MatriMix（511）形成的肿瘤切片进行Masson三色染色，观察到大量具有血管侵犯和核异型细胞（图2）。此外，使用各标志物的免疫荧

● 光染色显示，肿瘤内局部存在大肠癌细胞和血管内皮细胞（图3）

图1. 小鼠皮下移植实验

移植患者来源肿瘤球4周后的小鼠（上：MatriMix（511）；下：EHS肿瘤提取物）

图2. 肿瘤切片的Masson三色染色

回收使用MatriMix（511）将患者来源肿瘤球移植至小鼠体内后形成的肿瘤，使用Masson三色染色法染色切片。

（左：低倍率放大图 ；右：高倍率放大图）

图3 肿瘤切片的免疫荧光染色

回收使用MatriMix（511）将患者来源肿瘤球移植至小鼠体内后形成的肿瘤，使用各标志物染色肿瘤切片

（左：Type lV Collagen，Type l Collagen，CEA）；右：DAPI, αSMA, PECAM-1）

◆总结

上述结果表明，在将癌症患者来源肿瘤球移植至小鼠体内的实验中，MatriMix (511) 可有效用于肿瘤形成。今后，将继续评估其作为PDSX（Patient-Derived Spheroid Xenograft）模型的有效性。

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